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測定核苷酸在核酸分子中排列次序的方法。遺傳信息是以核苷酸不同的排列方式儲存在DNA中，然后再通過信使RNA翻譯成蛋白質(zhì)，從而表現(xiàn)出各種生物性狀。因此，DNA和RNA的核苷酸序列分析是在分子水平上研究生物的結(jié)構(gòu)和功能的重要方法之一。

1965年霍利(R.W.Holley)首先測定了酵母丙氨酸t(yī)RNA的核苷酸序列(76核苷酸長)，1977年分別由桑格(F.Sanger)和吉爾伯特(W.Gilbert)發(fā)明的DNA序列測定方法是核苷酸序列測定方法的重大突破。

圖 1 DNA序列測定步驟示意圖

桑格的方法稱為末端終止法。在這個方法中通常把要測定的DNA片段用重組DNA技術(shù)接在病毒M13載體上，讓病毒產(chǎn)生帶待測的DNA片段的單鏈 DNA模板。首先把模板和 ......